معرفی باکتری Stenotrophomonas maltophilia بعنوان عامل بیوکنترل سوسک چهار نقطه‏ ای حبوبات Callosobruchus maculatus F.”“

کد مقاله : 1063-24IPPC (R4)
نویسندگان
1گروه گیاهپزشکی دانشگاه ازاد واحد تبریز
2گروه گیاهپزشکی دانشکده کشاورزی دانشگاه تبریز
چکیده
سوسک چهار نقطه ‏ای با نام علمی Callosobruchus maculatus F. (Coleoptera; Chrysomelidae) از آفات مهم انباری بخصوص حبوبات می‏باشد که در بسیاری از مناطق ایران از جمله استان‏های آذربایجان خسارت قابل ملاحظه ای ایجاد می‏کند. برای کنترل این آفت راه‏های مختلفی تاکنون پیشنهاد شده است که از جمله جدیدترین و بی خطرترین آنها کنترل بیولوژیک افت با استفاده از عوامل کنترل بیولوژیک حشرات است. انواع مختلفی از قارچ‏ها، پروتوزوآها و باکتری‏های تا کنون بعنوان کنترل کننده ی سوسک چهارنقطه‏ای گزارش شده است. هدف از این تحقیق، جداسازی و شناسایی باکتری‏های همراه با سوسک چهار نقطه‏ای و بررسی کارایی آنها در کنترل جمعیت این حشره در شرایط آزمایشگاهی بود. بدین منظور کلونی اولیه از جمعیت های مختلفی از این آفت از مزارع استان آذربایجان شرقی جمع‏آوری و به آزمایشگاه منتقل شد. حشرات مشکوک به بیماری یا حشرات مرده‏ی داخل جمعیت‏ها پس از مشاهده، جمع‏آوری و پس از استریل سطحی به روی محیط کشت نترینت آگار (NA) منتقل گردید. جدایه‏های باکتریایی رشد کرده، جداسازی و خالص‏سازی گردیدند. به منظور زیست سنجی، سوسپانسیونی به غلظت یک میلیون باکتری در میلی لیتر از هر یک از جدایه‏ی باکتریایی تهیه و بصورت جداگانه در سه تکرار روی جمعیت‏های یکسانی از آفت پاشیده شد. پس از محاسبه مرگ و میر حاصل در جمعیت سوسک، قوی‏ترین جدایه باکتری که بیشتر از 40% مرگ و میر را در داخل جمعیت سوسک چهارنقطه‏ای ایجاد کرده بود انتخاب گردید. برای شناسایی جدایه باکتریایی منتخب، با استفاده از پرایمر عمومی محصول پی سی ار ناحیه 16s rDNA باکتری توالی یابی گردید. توالی حاصل با توالی های موجود در بانک ژن مقایسه و درخت فیلوژنتیکی برای آن رسم گردید. نتیجه توالی یابی نشان داد باکتری منتخب متعلق به گونه Stenotrophomonas maltophilia می باشد. آزمون های بیوشیمیایی شناسایی مولکولی را تایید کردند.
کلیدواژه ها