فیتوپلاسماهای همراه با بیماری فیلودی پروانش در استان کرمان
کد مقاله : 1399-24IPPC (R3)
نویسندگان
1بخش گیاهپزشکی دانشکده کشاورزی دانشکاه شهید باهنر کرمان.
2بخش گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید باهنر کرمان
3عضو هیئت علمی
4مرکز تحقیقات و اموزش کشاورزی و منابع طبیعی جنوب استان کرمان
چکیده
پروانش (Catharanthus roseous) در مناطق گرمسیری و نیمه گرمسیری گیاهی چند ساله است. علاوه بر کاشت در فضاهای سبز ، از آن به عنوان یک گیاه دارویی نیز استفاده می‌شود. در سال 1396 در جنوب استان کرمان، علایم بیماری فیلودی و زردی بر روی بوته‌های پروانش مشاهده شد. جهت بررسی عامل بیماری، از شاخه‌های برگ‌دار بوته‌های دارای و فاقد علایم نمونه‌برداری شد. از شاخه‌های کوچک دارای علایم به بوته‌های پروانش سالم بذری در شرایط گلخانه پیوند شدند. جهت انجام آزمونهای واکنشهای زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) با استفاده از روشی بر پایه CTAB "دی ان آ" کل استخراج شد. جهت تکثیر بخشی از ژن 16Sr RNA، از PCR نوع آشیانه‌ای و جفت آغازگر‌های عمومی فیتوپلاسمایی P1/P7 و R16F2n /R16R2 استفاده گردید. در الکتروفورز محصولات PCR در ژل آگارز یک درصد و رنگ‌آمیزی با اتیدیم برماید، قطعات "دی ان ا" حدود 1800 و 1250 جفت باز مشاهده شد. اما محصولی از نمونه‌های بدون علایم تکثیر نشد. قطعات 1250 جفت بازی با روش مستقیم تعیین توالی شدند. پس از همردیف‌سازی ترادف‌های حاصل در ژن بانک، برخی از استرینها مشابه “Candidatus Phytoplasma trifolii”و بعضی مشابه ‘Ca. Phytoplasma phoenicium’ تشخیص داده شدند. جهت تعیین جایگاه تاکسونومی استرینها، توالی‌ها در نرم افزار برخط IphyClassifier و با آنزیم‌های برشی استاندارد فیتوپلاسماها، هضم مجازی شدند. در نتیجه هضم آنزیمی مشخص شد که برخی از توالی‌های فیتوپلاسمایی حاصل از بوته‌های پروانش، با زیر گروه 16SrVI-A “Ca. Phytoplasma trifolli” و برخی دیگر با زیرگروه 16SrIX-C “Ca. Phytoplasma phoenicium” شباهت بالایی دارند. در آزمونهای زیست سنجی، بوته‌های پروانش پیوند شده با منابع آلوده، علایم زردی و فیلودی را نشان دادند و در آزمونهای PCR نیز مثبت شدند. بر اساس یافته های این بررسی، دو فیتوپلاسمای مختلف در ایجاد بیماری فیلودی پروانش در استان کرمان دخالت دارند.
کلیدواژه ها