نقش پپتیدهای غیر ریبوزومی در بیماریزایی باکتری Erwinia amylovora
کد مقاله : 1431-24IPPC (R3)
نویسندگان
1گروه گیاهپزشکی دانشکده کشاورزی دانشگاه فردوسی مشهد
2گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسی مشهد
چکیده
بیماری آتشک، یک بیماری مخرب است که تهدیدی جدی برای درختان میوه دانه دار و سایر گونه‌های اقتصادی وابسته به تیره Rosaceae محسوب می‌شود. پلی ساکاریدهای خارج سلولی آمیلووران و لوان، تیپ سوم سیستم ترشحی، سیدروفور دس فری اگزامین E، سیستم‌های تنظیمی کننده دوجزئی و تیپ ششم سیستم ترشحی از فاکتورهای بیماریزایی باکتری E. amylovora هستند. به منظور بررسی ژن‌های دخیل در بیماریزایی باکتری E. amylovora در سویه بومی EaUMG3 جدا شده از گلابی در شهرستان مشهد یک کتابخانه جهش یافته تصادفی ایجاد شد. ترانسپوزون mimi-Tn5 lacZ با روش کانجوگیشن سه عضوی به داخل سویه EaUMG3 منتقل شد. یکی از موتانت‌های ترانسپوزونی که بیماریزایی آن روی میوه‌های نارس گلابی کاهش نسبی یافته بود انتخاب شد. واکنش زنجیره‌ای پلی مراز معکوس (IPCR) برای ردیابی توالی مربوط به ناحیه الحاق ترانسپوزون روی ژنوم موتانت EaUMG3-m415 استفاده شد. بررسی توالی بدست آمده در بانک ژن نشان دهنده وقوع الحاق ترانسپوزونی در ناحیه کد شونده ژن EAMY_0450 متعلق به گروه non-ribosomal pepetide synthetase (NRPS) در این موتانت بود. موتانت حذف ژنی EaUMG3-0450 در سویه تیپ وحشی EaUMG3 با استفاده از یک وکتور کشنده و با شیوه دو مرحله‌ای نوترکیبی همولوگ بوسیله روش کانجوگیشن دو عضوی ایجاد شد. موتانت بدست آمده EaUMG3-0450 (دارای حذف شدگی کروموزومی ژن EAMY_0450 مشتق شده از سویه EaUMG3) بیماریزایی کمتری در مقایسه با تیپ وحشی روی میوه‌های گلابی نارس داشت. اگرچه ناحیه نکروز ایجاد شده روی نهال گلابی دو ساله توسط EaUMG3-0450 تفاوت معناداری با سویه تیپ وحشی نداشت. نتایج نشان هنده کاهش نسبی در تولید آمیلووران، تشکیل بیوفیلم و حرکت شناوری در موتانت EaUMG3-0450 در مقایسه با تیپ وحشی EaUMG3 بود، در حالیکه هاله تولید شده سیدروفور روی محیط CAS-agar همانند تیپ وحشی بود. این مطالعه نشان داد که ژن EAMY_0450 متعلق به گروه NRPS می‌تواند روی سنتز برخی از فاکتورهای بیماریزایی و بیماریزایی باکتری E. amylovora تأثیر داشته باشد.
کلیدواژه ها